TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent

Mirus转染试剂TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent，该产品旨在增强载体转染到

贴壁或悬浮的HEK 293细胞的转染效率，并增加重组腺相关病毒或慢病毒的产量。

使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率。使用不同的转染试剂将pAAV-hrGFP，pAAV-RC和pAAV-Helper（按照1:1:1比率，1.5μg，Agilent）转染到悬浮Ffeestyle –F细胞（培养于FreeStyleTM F17培养基, A）和贴壁的293T / 17细胞（B）中：TransIT-VirusGEN（2:1, vol:wt），Lipofectamine 2000（3:1），Lipofectamine 3000（3:3:1）和25kDa PEI（4:1）。收获的病毒用于转导HT1080细胞，转导后48h后，使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞仪检测GFP的表达。功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。

使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率。使用不同的转染试剂将pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP TM载体和Lentivirus慢病毒混合物（1:1）转染到悬浮Ffeestyle –F细胞（培养于FreeStyleTM F17培养基, A）和贴壁的293T / 17细胞（B）中： TransIT-VirusGEN® (3:1, vol:wt), Lipofectamine® 2000 (2:1 (A)或 3:1 (B)), Lipofectamine® 3000 (2:2:1 (A) 或3:3:1 (B)) 和 25 kDa PEI (4:1)。收集上清液，过滤（0.45μm），使用293T / 17细胞滴定。 使用8μg/ ml TransduceIT TM进行慢病毒转导，导72h后使用guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪检测GFP表达情况。

功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。

TransIT-VirusGEN®转染试剂的强扩展性。使用TransIT-VirusGEN®转染试剂（2:1 (vol:wt), Mirus）

将pAAV-hrGFP，pAAV-RC和pAAV-Helper（按照1:1:1比率，1.5μg/ml，Agilent）转染到悬浮Ffee

style –F细胞（培养于FreeStyleTM F17培养基, A）和贴壁的293T / 17细胞（B）中。收获的病毒用于转导HT1080细胞，转导后48h后，使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞仪检测GFP的表达。功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。

原文出处：【Mirus新品推荐】TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent