酶抑制与多底物反应的深入解析
氨基酸选择性化学修饰剂
氨基酸选择性化学修饰剂可用于特异性地修饰蛋白质中的特定氨基酸残基,这对于研究酶的结构和功能至关重要。以下是一些常见的氨基酸选择性化学修饰剂及其相关信息:
| 优先修饰的氨基酸 | 修饰试剂 | 注释 |
| — | — | — |
| 羧酸盐 | 异恶唑鎓盐(如三甲基氧鎓氟硼酸盐)、碳二亚胺 | |
| 半胱氨酸 | 碘乙酰胺、马来酰亚胺、Ellman试剂、对羟基汞苯甲酸酯 | 碘乙酰胺也可修饰组氨酸和赖氨酸残基 |
| 组氨酸 | 焦碳酸二乙酯 | 也可与赖氨酸、半胱氨酸和酪氨酸反应 |
| 赖氨酸 | 酸酐、琥珀酰亚胺酯、异硫氰酸盐、三硝基苯磺酸 | 试剂与伯胺反应,也可修饰蛋白质的氨基末端 |
| 丝氨酸 | 卤代甲基酮、肽醛 | 攻击丝氨酸亲核试剂,用于修饰丝氨酸蛋白酶的活性位点;肽醛也可修饰半胱氨酸蛋白酶的活性位点半胱氨酸 |
| 色氨酸 | N - 溴代琥珀酰亚胺、硝基苄基卤化物 | |
| 酪氨酸 | 四硝基甲烷、氯胺T、NaI和过氧化物酶 | 氯胺T也可修饰组氨酸和甲硫氨酸残基 |
Tsou图分析
在研究酶的化学修饰时,Tsou图是一种重要的分析工具。通过测量不同浓度修饰剂下酶的活性变化($v_i/v_0$),以及与酶相关的光谱或放射性标记的量($z$),可以绘制Tsou图。
已知公式:
$ \frac{v_i}{v_0} = (1 - \frac{z}{n})^x $ (10.18)
则有:
$ (\frac{v_i}{v_0})^{\frac{1}{x}} = 1