用Aspera下载NCBI数据,速度快100倍

科研党必看!10 分钟学会 Aspera,测序数据下载速度提升 100 倍

你是否经历过这样的崩溃时刻:

为了分析 PRJNA1063518 项目的 20 个测序样本,用 SRA Toolkit 下载,300M 的网络下,单个样本(20G)要下 4 小时,批量下载还经常断连,重下又要从头开始?

如果告诉你,有一款工具能把下载时间压缩到 20 分钟,还支持断点续传,你会不会立刻想学会?

它就是Aspera—— 科研领域 “大文件传输的天花板”,今天从 “原理→安装→实战” 全拆解,新手也能直接上手。

一、先搞懂:Aspera 到底是什么?为什么这么快?

很多人只知道 Aspera “快”,但不知道它快在本质。先花 2 分钟搞懂核心,后续用起来更顺手。

1. Aspera 的定位:专为 “大文件 / 远距离” 而生

Aspera 是 IBM 旗下的高速数据传输工具,核心应用场景就是超大规模文件传输—— 比如几十 G 的测序数据、几百 G 的影像文件,或是跨国家实验室的协作数据交换。

它不像 SRA Toolkit 那样 “绑定 NCBI”,而是通用的传输工具,在 ENA(欧洲核苷酸档案)、EBI(欧洲生物信息研究所)等科研数据库中,都被官方推荐用于下载原始数据。

2. 快的关键:FASP 技术,颠覆传统 TCP 传输

传统下载工具(比如 SRA Toolkit、FTP、HTTP)都基于TCP 协议,这个协议有个致命缺点:

  • • 一旦网络出现轻微丢包(哪怕 1%),就会大幅降低传输速度(怕传错数据,不敢 “全速跑”);
  • • 远距离传输时,TCP 的 “拥塞控制” 会更保守,速度直接腰斩。

而 Aspera 用的是FASP 协议(基于 UDP) ,相当于给数据传输装了 “涡轮增压”:

  • • 丢包不怕:只重传丢包的部分,不影响整体速度;
  • • 带宽榨干:动态检测网络最大带宽,比如 300M 的网,能跑到 280M(TCP 最多跑 150M);
  • • 安全不减速:用 AES-256 加密数据,却不影响传输速度(TCP 加密会慢 30%+)。

这就是为什么同样下 20G 的测序数据,SRA Toolkit 要 4 小时,Aspera 只要 20 分钟 ——不是网络变快了,是传输协议换了 “赛道”

二、对比 SRA Toolkit:什么时候该用 Aspera?

很多人会问:“SRA Toolkit 是 NCBI 官方的,我为什么要换 Aspera?”

答案很简单:看你的需求场景。先看一张对比表,再给选择建议:

对比维度AsperaSRA Toolkit
核心优势速度快(10-100 倍)、支持批量下载官方工具、可直接转 SRA 为 Fastq
适用数据量单样本 > 5G、批量样本(>10 个)单样本 < 5G、需转格式的场景
依赖网络对丢包不敏感(适合远距离 / 差网络)依赖稳定网络(丢包易断连)
输出格式直接下载 Fastq(无需转格式)先下 SRA 格式,再转 Fastq
安装复杂度稍高(需配环境变量)低(conda 一键装)

选择建议:

  1. 1. 如果你只下 1-2 个小样本(<5G),且需要把 SRA 转成 Fastq—— 用 SRA Toolkit(方便);
  2. 2. 如果你下批量样本(>10 个)或大样本(>5G),不管要不要转格式 ——必用 Aspera(省时间,直接下 Fastq,不用转格式);
  3. 3. 如果你在偏远地区 / 网络不稳定 —— 用 Aspera(断连后能断点续传,SRA Toolkit 要从头下)。

三、安装 Aspera:2 种方案,新手推荐 Conda(避坑版)

Aspera 的安装有两种主流方式:Conda 安装(推荐,新手友好)直接下载安装包(备选,无 Conda 时用)

先讲推荐的 Conda 方案,每一步都有命令和注释,复制粘贴就能跑。

方案 1:Conda 安装(推荐,避免环境冲突)

Conda 的优势是 “隔离环境”,不会和你电脑里的其他软件冲突,新手必选。

步骤 1:检查 Conda 是否安装

先打开 Linux 终端,输入以下命令,看是否有 Conda 版本输出(比如 conda 23.10.0):

    
    
    
  conda --version
  • • 如果提示 “command not found”:先装 Miniconda(轻量版,适合科研),命令如下(复制粘贴,一路按回车):
    
    
    
  # 下载Miniconda(Linux 64位,其他系统可换链接)

wget https://repo.anaconda.com/miniconda/Miniconda3-py38_23.10.0-1-Linux-x86_64.sh

# 安装Miniconda(一路按回车,最后输入yes确认)

bash Miniconda3-py38_23.10.0-1-Linux-x86_64.sh

# 激活Conda(关闭终端重开,或执行以下命令)

source ~/.bashrc
步骤 2:创建 Aspera 专属环境(关键!避冲突)

不要用 base 环境装!创建一个专门的环境,后续出问题不影响其他软件:

    
    
    
  # 创建名为aspera的环境,用Python 3.8(兼容性最好)

conda create -n aspera python=3.8 -y

# 激活aspera环境(后续操作都在这个环境里)

conda activate aspera
  • • 激活后,终端前面会出现(aspera),表示在专属环境里了。
步骤 3:Conda 安装 Aspera(一键搞定)

Aspera 在 bioconda 频道里,直接用 conda 装,不用手动找安装包:

    
    
    
  # 从bioconda频道安装aspera-connect(版本会自动选最新稳定版)

conda install hcc::aspera-cli -y
步骤 4:验证安装 + 配置环境变量(新手最容易漏的一步)

安装后,先检查是否能调用ascp(Aspera 的核心命令):

    
    
    
  ascp --version
  • • 如果提示 “ascp: command not found”:说明环境变量没配,按以下步骤配(复制粘贴):
    
    
    
  # 1. 找到Aspera的安装路径(Conda环境里的路径)

# 执行后会输出路径,比如\~/miniconda3/envs/aspera/bin

find ~ -name "ascp" | grep "envs/aspera" | xargs dirname

# 2. 把路径写入环境变量(替换下面的\[你的路径]为上一步输出的路径)

echo 'export PATH=[你的路径]:$PATH' >> ~/.bashrc

# 3. 激活环境变量(不用重启终端)

source ~/.bashrc

# 4. 再次验证(如果输出版本号,比如ascp version 4.2.6,就成功了)

ascp --version

方案 2:直接下载安装包(备选,无 Conda 时用)

如果你的电脑没装 Conda,或不想用 Conda,用这个方案(步骤稍多,但也不难)。

步骤 1:下载对应系统的安装包

先看你的 Linux 是 32 位还是 64 位(几乎都是 64 位):

    
    
    
  uname -m  # 输出x86_64就是64位

然后下载 64 位安装包(用 wget 直接下,或去官网下):

    
    
    
  # 下载最新版(如果链接失效,去官网https://www.ibm.com/products/aspera-connect找)

wget https://download.asperasoft.com/download/sw/connect/4.2.6/aspera-connect-4.2.6.113-linux-64.tar.gz
步骤 2:解压 + 安装
    
    
    
  # 解压安装包(会生成aspera-connect-4.2.6.113-linux-64.sh)

tar -zxvf aspera-connect-4.2.6.113-linux-64.tar.gz

# 执行安装脚本(一路按回车,最后输入yes)

bash aspera-connect-4.2.6.113-linux-64.sh
  • • 安装成功会提示:Installing Aspera Connect 4.2.6... done.,默认装在~/.aspera/connect/
步骤 3:配置环境变量 + 验证

和 Conda 方案的步骤 4 一样,配环境变量:

    
    
    
  # 写入环境变量(默认安装路径)

echo 'export PATH=~/.aspera/connect/bin:$PATH' >> ~/.bashrc

# 激活环境变量

source ~/.bashrc

# 验证(输出版本号就成功)

ascp --version

四、实战:用 Aspera 下载 PRJNA1063518 原始数据(从 0 到 1)

学会安装后,最核心的是 “怎么找到下载链接” 和 “怎么用命令下载”。以 PRJNA1063518(NCBI 的 SRA 项目,包含多个肠道微生物测序样本)为例,一步一步教。

前置知识:Aspera 下载的 “链接规则”

Aspera 下载需要知道 “两个东西”:

  1. 1. 服务器地址:ENA 的 Aspera 服务器是era-fasp@fasp.sra.ebi.ac.uk(固定的,不用改);
  2. 2. 文件路径:ENA 的原始数据路径规则是/vol1/fastq/[SRR前6位]/00[SRR最后1位]/[完整SRR号]/

    比如 SRR 号是 SRR28123456:

  • • SRR 前 6 位:SRR281;
  • • SRR 最后 1 位:6;
  • • 完整路径:/vol1/fastq/SRR281/006/SRR28123456/

所以,整个下载地址就是:era-fasp@fasp.sra.ebi.ac.uk:/vol1/fastq/SRR281/006/SRR28123456/

步骤 1:获取 PRJNA1063518 的所有 SRR 号

首先要知道这个项目下有哪些样本(即 SRR 号),有两种方式:网页版(新手友好)命令行版(批量高效)

方式 1:网页版(ENA 网站,可视化操作)
  1. 1. 打开 ENA 官网:https://www.ebi.ac.uk/ena/browser/home;
  2. 2. 在搜索框输入PRJNA1063518,点击搜索;

 

  1. 3. 点击展开 “Show Column Selection”;

 

  1. 4. 只勾选所有 "fastq_aspera" 选项,并点击上方的 “TSV”,会下载一个文件,里面有所有样本的下载地址。

 

 

5.打开下载的文件,全选粘贴到Excel表格里面,删除第一列,然后点击‘A’——>‘数据’——>'分列',然后点击‘下一步’——>'勾选分号'——>'完成',这样你就得到了两列,然后将'B'列的内容粘贴到'A'列下面,最后按照‘升序’排序。最终,全选并复制文档(除去第一列表头),然后粘贴到‘sra_runs.txt’文本文件中。每一行代表一个单端序列链接。

 

 

方式 2:命令行版(用 edirect 工具,批量获取)

如果样本多(>20 个),用命令行更高效:

    
    
    
  # 1. 先安装edirect(NCBI的工具,用于查询SRA数据)

conda install -c bioconda edirect -y

# 2. 查询PRJNA1063518的所有SRR号,保存到sra_runs.txt

esearch -db sra -query PRJNA1063518 | efetch -format runinfo | cut -d ',' -f 1 | grep -v Run > sra_runs.txt

# 3. 查看文件(会看到所有SRR号,每行一个)

cat sra_runs.txt

步骤 2:单个样本下载(先练手)

以 SRR28123456 为例,先试单个下载,熟悉命令。

核心命令(复制粘贴,改 SRR 号即可)
    
    
    
  # 先创建一个存放数据的文件夹(避免混乱)

mkdir -p ~/PRJNA1063518_rawdata

cd ~/PRJNA1063518\_rawdata  # 进入文件夹

# 下载命令(关键!改SRR号为你的样本号)

ascp -QT -l 300m -P 33001 -i ~/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh era-fasp@fasp.sra.ebi.ac.uk:/vol1/fastq/SRR281/006/SRR28123456/ ./
命令参数解释(新手必看,知道为什么这么写)
参数作用新手建议
-k 2断点续传建议加上,如果下载中断,再次运行能接着下载
-QT禁用进度条 + 禁用加密(加速下载)必加,能快 10%-20%
-l 200m限制带宽为 200Mbps(避免占满网络)按你的网络改,比如 500M 网写 500m
-P 33001用 Aspera 的默认端口(避免被防火墙拦截)固定 33001,不用改
-i [私钥路径]指定 Aspera 的私钥(验证身份用)路径固定:~/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh
era-fasp@...ENA 的服务器地址 + 文件路径改 SRR 号对应的路径即可
./下载到当前文件夹(即 PRJNA1063518_rawdata)不用改,或指定其他路径(比如~/data/)
下载成功的标志

终端会输出类似这样的信息:

SRR28123456_1.fastq.gz 100% 20.5GB 300Mbps 00:00:00

表示 20.5GB 的文件,用 300Mbps 的速度下完了,耗时 0(实际是 11 分钟左右)。

步骤 3:批量下载所有样本(高效版)

如果有 10 个以上样本,手动改命令太麻烦,写个循环脚本批量下载。

脚本 1:用网页版下载的 aspera_download.txt

如果从 ENA 网页下载了sra_runs.txt,里面有所有下载地址,直接循环读取:

    
    
    
  # 进入数据文件夹

cd ~/PRJNA1063518_rawdata

# 批量下载脚本(逐行读取下载地址)

while read line; do​
  # line就是每个样本的下载地址(比如era-fasp@...)​
  ascp -k 2 -QT -l 200m -P 33001 -i ~/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh $line ./​
done < ~/Downloads/sra_runs.txt  # 替换为你的sra_runs.txt路径
脚本 2:用命令行生成的 sra_runs.txt

如果只有 SRR 号列表(sra_runs.txt),用脚本自动拼路径:

    
    
    
  # 进入数据文件夹

cd ~/PRJNA1063518_rawdata

# 批量下载脚本(自动拼路径)​
while read srr; do​
  # 提取SRR前6位(比如SRR28123456→SRR281)​
  srr_prefix=${srr:0:6}​
  # 提取SRR最后1位(比如SRR28123456→6)​
  srr_suffix=${srr: -1}​
  # 拼完整路径,执行下载​
  ascp -k 2 -QT -l 300m -P 33001 -i ~/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh era-fasp@fasp.sra.ebi.ac.uk:/vol1/fastq/$srr_prefix/00$srr_suffix/$srr/ ./​
done < ~/sra_runs.txt  # 替换为你的sra_runs.txt路径
批量下载的小技巧
  • • 后台运行:如果样本多,想让它后台下载(关闭终端也能继续),在命令前加nohup&
    
    
    
  nohup bash 你的脚本.sh > download.log 2>&1 &
  • • 查看进度:用tail -f download.log查看下载日志,或用du -sh ~/PRJNA1063518_rawdata看文件夹大小变化。

五、新手必看:3 个常见问题 + 避坑指南

用 Aspera 时,新手最容易遇到 3 个问题,提前避坑!

问题 1:提示 “Permission denied (publickey)”(权限错误)

  • • 原因:私钥路径错了,Aspera 找不到验证身份的私钥。
  • • 解决:确认私钥路径是~/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh,用以下命令找私钥:
    
    
    
  find ~ -name "asperaweb_id_dsa.openssh"  # 找到后替换到命令里的-i参数后

问题 2:提示 “Connection refused”(连接失败)

  • • 原因:端口 33001 被防火墙拦截,或 ENA 服务器暂时不可用。
  • • 解决:
  1. 1. 先测端口是否通:telnet ``fasp.sra.ebi.ac.uk`` 33001(能通会提示 Connected);
  2. 2. 若不通,换端口(试试 33002):把命令里的-P 33001改成-P 33002
  3. 3. 若还不通,等 10 分钟再试(ENA 服务器偶尔维护)。

问题 3:下载速度慢(只有 10-20Mbps)

  • • 原因:带宽限制设低了,或没加-QT参数。
  • • 解决:
  1. 1. 把-l 200m改成更高的数值(比如你的网是 1G,改-l 1g);
  2. 2. 确保命令里加了-QT参数(禁用加密和进度条,能提速);
  3. 3. 避开高峰期(欧洲白天是 ENA 服务器的高峰期,中国晚上下载更快)。

六、总结:Aspera 的核心价值,不止是 “快”

看到这里,你可能会说:“我学会用 Aspera 下载数据了,但它还有其他用吗?”

当然有!Aspera 的核心价值是 “解决大文件传输的效率痛点”,除了下载测序数据,还能:

  1. 1. 传数据到实验室服务器:比如把本地分析好的 100G 结果传给导师的服务器,用 Aspera 只要 10 分钟;
  2. 2. 跨平台协作:和国外实验室共享数据,不用等几天,几小时就能传完;
  3. 3. 下载其他大文件:比如 TCGA 的影像数据、千人基因组计划的原始数据,都能用 Aspera 加速。

最后,送新手一句话:科研中 “工具选择” 比 “埋头干活” 更重要—— 用对 Aspera,省下的时间能多跑一次实验、多改一篇论文。

如果在使用中遇到问题,欢迎在评论区留言,我会一一回复!

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