Agilent1260HPLC工作原理及简单操作PPT教学课件.pptx

Agilent 1260高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）是一种广泛应用于化学分析、生物医学研究和药物检测的分离技术。它由多个关键组件构成，包括储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪。 1. 储液器与泵：储液器存储流动相，即用于分离样品的液体介质。高压泵负责将流动相注入系统，确保稳定的压力流过整个系统。对于Agilent 1260 HPLC，这通常涉及到四元泵，能够处理多种溶剂混合物，通过比例阀来调节不同溶剂的比例。 2. 进样器：样品溶液通过进样器进入流动相。为了保证分析结果的准确性，样品需完全溶解在流动相中，并且无固体颗粒。进样量应尽量小以减小分析误差。自动进样器可以实现连续、精确的样品加载，同时提供洗针功能以减少记忆效应。 3. 色谱柱：色谱柱是分离样品的关键部分，其中填充有固定相，如化学键合硅胶或其他材料。样品中的各组分根据它们与固定相和流动相之间的相互作用力差异进行分离。 4. 检测器：检测器监测从色谱柱中流出的样品，将其浓度转换为电信号，再由记录仪记录形成色谱图。不同类型的检测器适用于不同类型的样品，例如紫外/可见光检测器、荧光检测器等。 5. 维护要点：所有溶剂应为HPLC级别，水需为二次超纯水。溶剂需要过滤，并在必要时超声脱气。溶剂瓶中的过滤头要定期检查和更换，避免堵塞。使用在线真空脱气机时，需注意其操作规程，尤其是在更换溶剂或系统未使用一段时间后。 6. 泵维护：泵头组件包括出口球阀、清洗阀和柱塞等，需要定期清洁和维护。当系统压力过高或泵运行异常时，可能需要更换过滤白头。此外，应选择与溶剂兼容的密封材料，避免使用强酸、强碱和腐蚀性溶剂。 7. 样品准备：样品必须完全溶解，过滤去除固体颗粒，以防止对色谱柱造成损害。对于自动进样器，样品瓶应保持清洁，洗针瓶不建议添加瓶垫。 8. 操作流程：开机时，需按照正确的顺序启动设备并进行必要的系统校准。关机时，应遵循安全步骤，如充分清洗泵和系统，避免溶剂残留。 通过理解HPLC的工作原理和正确操作方法，用户可以优化分析性能，提高实验效率，并确保设备的长期稳定运行。本PPT教学课件详细阐述了这些关键知识点，为用户提供了宝贵的参考和指导。