Practica 4 de laboratorio toxicologia

1 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
UNIDAD ACADÉMICA CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumna: Tania Carolina Barba Toro
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N° 7
Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 22 de junio del 2015
Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 29 de junio del 2015
PRÁCTICA N° 4
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Animal de Experimentación: Rata Wistar.
Vía de Administración: Vía Parenteral (Intraperitoneal)
Volumen administrado: 10 ml de Cloroformo.
Tiempos:
Inicio de la práctica: 08:05 am
Hora de Inicio y finalización de Disección: 08:07 am – 08:20 am
Hora de Inicio y finalización de Destilación: 08:25 am – 09:00 am
Deceso del animal: 30 minuto
Síntomas: Vomito, cefalea, vértigo y nauseas.
Finalización de la práctica: 09:30 am
10

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta la rata wistar ante la Intoxicación por
Cloroformo.
2. Establecer la sintomatología y controlar el tiempo en que actúa el
Cloroformo.
3. Conocer mediante reacciones de identificación la presencia de
Cloroformo.
PROCEDIMIENTO
1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.
2. Tener todos los materiales listos en la mesón de trabajo
3. Administramos a la rata wistar, 10 ml de Cloroformo por vía
intraperitoneal, anotamos el tiempo.
4. Colocar la rata wistar en la panema.
5. Observamos las manifestaciones que la rata wistar hasta su muerte.
6. De ahí procedemos a la disección de la rata wistar.
MATERIALES
 Guantes
 Mascarilla
 Zapatones
 Bata de laboratorio
 Jeringa de 10 cc
 Cronómetro
 Equipo de disección
 Bisturí
 Portatubo
 Probeta
 Vaso de precipitación
 Erlenmeyer
 Equipo de destilación.
 Tubos de ensayo
 Pipetas
SUSTANCIAS
 Alcohol De 95ª
 Nitrato De Plata
 Ácido Clorhídrico
 Potasa Alcohólica
 Percloruro De Hierro
 Amoniaco Diluido
 Beta Naftol
 Solución Alcohólica
Concentrada De Potasa
 Cristal De Yodo
 Clorhidrato De Piperacina
 Reactivo De Benedict

7. Colocando las vísceras (picadas o trituradas lo más finas posibles) en el
recipiente adecuado (balón del equipo de destilación).
8. Preparar 2gr de ácido tartárico en 50ml de agua destilada, luego se añade
la solución de ácido tartárico a las vísceras en el balón.
9. Añadir cierta cantidad de Ácido tartárico, se deja en contacto por 30
minutos para acidular la muestra.
10. Luego de este tiempo se filtra, previamente se arma el equipo de
destilación, en un Erlenmeyer recogeremos el destilado.
11. Con el filtrado luego procedimos a realizar las reacciones de
identificación de Cloroformo en medios biológicos.
12. Culminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.
Reacciones y Conducta Post-Administración
Tiempo de muerte: 30 minutos (7:35 – 8:09)
Síntomas:
Vomito,
cefalea,
vértigo y nauseas.
Muerte
REACCIONES :
1. Solución Alcohólica.- En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan
unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª
que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se
observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido
clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando
un precipitado de cloruro de plata.
2. Reacción de dunas.- Al adicionar unas gotas de destilado que contiene
cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se
originan formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción
se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un
precipitado en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose
un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido.
3. Reacción de Lustgarten.- Al calentar la muestra con unos miligramos
de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa
(preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se
obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos
oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina
rojo.
4. Reacción de fujiwara.- En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de
sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que
contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño
de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que
varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible
para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de
algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
5. Reacción de roseboom.- Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la
solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de
piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración
violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
6. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo,
reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del
toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde,
amarillo, naranja o rojo ladrillo.

GRÁFICOS:
5.- Sacamos todas las
vísceras y las picamos
para colocarlas en un
beaker
7.- Añadir cierta cantidad
de Ácido tartárico, se deja
en contacto por 30
minutos para acidular la
muestra.
8.- Se filtra, previamente se
arma el equipo de
destilación, y en un
Erlenmeyer recogeremos el
destilado.
4. Procedemos a
la disección de
la Rata Wistar.
6.- Colocamos todo esto
en el balón colocando
con 50 perlas de vidrio
9.- Con el filtrado
procedemos a realizar las
reacciones de identificación
de formaldehido en medios
biológicos
4 5 6
7 98
1.- Animal de
experimentación Rata
Wistar.
3.- Colocamos en la rata
wistar en la panema y
observamos sus
manifestaciones.
1
2 3
2.- Administramos el
Metanol a la rata
wistar por vìa
intraperitonial

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS
BIOLÓGICOS:
1) Reacción de Schiff:
Reacción Positivo no característico Cambio de coloración
2) Reacción de Rimini: Positivo no característico
Reacción positivo no característico Cambio de coloración
ANTES DESPUES
ANTES DESPUES

3) Reacción con la fenil hidracina: positivo no característico
4) Reacción de Marquis: Positivo no caracteristico
5) Con el ácido cromotrópico: Positivo no característico
ANTES DESPUES
ANTES DESPUES
ANTES DESPUÉS

6) Reacción de Hehner: Positivo no característico
Reaccion Reacción positivo no caracteristico Coloración beis
OBSERVACIONES:
 El uso de guantes y mascarilla es esencial al momento de
preparar la solución de cianuro ya que éste puede ser inhalado
causando efectos en nuestro organismo.
 Encender la campana de ventilación para eliminar el olor del
cianuro y así mismo los malos olores que se producen al disectar
la rata wistar.
 Pude observar que al administrar Metanol puro por vía
intraperitoneal al cobayo, éste presentó picazón, convulsiones, se
orinó, se observó además secreción ocular y por ultimo presentó
necropsia de la mayor parte de las vísceras al momento de abrirlo.
RECOMENDACIONES
 Es de vital importancia asegurarse que el equipo esté
correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el
escape de los vapores en el proceso de la destilación, siendo estos
en pequeñas cantidades mortales.
 Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
 Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
ANTES DESPUES

CONCLUSIONES
Al final de esta práctica la reacción que presenta la rata wistar
ante la intoxicación con metanol puro, aprendimos como el
metanol en una sustancia que puede provocar grandes daños en
los organismos vivos, observamos lo que provoca internamente el
metanol y los signos que presento el cobayo cuando a este se le
administro la sustancia, cabe mencionar que la dosis depende del
peso del ser vivo en este caso de la rata wistar.
CUESTONARIO
1. ¿Cuál es la Dosis Letal del Metanol?
Ingerir elevadas cantidades de metanol puede causar dolor de
cabeza, mareo, náusea, vómitos y muerte (de 20 a 25 g se tiene
una dosis mortal). Tomar más de medio litro o más puede causar
ceguera o pérdida de la visión, ya que puede dañar seriamente el
nervio óptico. Una exposición crónica puede ser causa de daños al
hígado o de cirrosis. La dosis letal de metanol para los humanos
varía entre 0,3 gramos y 1 gramo por kilogramo de masa
corpórea.
2. ¿Cuáles son los síntomas más comunes por intoxicación con
metanol?
Los síntomas pueden abarcar:
 Pulmones y vías respiratorias
o dificultad respiratoria
o paro respiratorio
 Corazón y vasos sanguíneos
o convulsiones
o presión arterial baja
 Sistema nervioso:
o comportamiento
agitado
o coma
o mareo
o dolor de cabeza
o crisis epiléptica

 Piel y uñas

o dolor abdominal (fuerte)
o diarrea
o problemas con la función hepática
o náuseas
o pancreatitis
o vómito
Otros: fatiga, calambres en las piernas, debilidad
3. ¿Cuáles son las aplicaciones y usos del metanol?
El metanol tiene una gran variedad de aplicaciones industriales.
Su uso más frecuente como materia prima para la producción
de metil-butil-éter, que es un aditivo para la gasolina. Se
emplea en la fabricación de formaldehído, ácido acético, cloro
metanos, metacrilato de metilo, metilaminas, dimetil
tereftalato, o como solvente o anticongelante en pinturas en
aerosol, pinturas de pared, limpiadores para carburadores y
compuestos para limpiar parabrisas de automóviles.
El metanol también se emplea como anticongelante en
vehículos, solvente de tintas, tintes, resinas, adhesivos,
biocombustibles y aspartame. El metanol puede ser también
añadido al etanol para hacer que éste no sea apto para el
consumo humano (el metanol es altamente tóxico) y para
vehículos de modelismo con motores de combustión interna.
4. ¿Cuál es la dosis letal en humanos?
La dosis letal probable de Formaldehído (como formalina)
para seres humanos (DL50) se encuentra entre 500 y 5000
mg/kg, que representa una cantidad total de entre 35 y 350
g para una persona de 70 kg de peso.
GLOSARIO:
 Anión gap: El anión gap es la diferencia entre los aniones
plasmáticos que habitualmente no se miden (proteínas,
sulfatos, fosfatos y ácidos orgánicos como lactato y piruvato)
y cationes plasmáticos que habitualmente no se miden (K+,
Ca2+
, Mg2+
). El anion gap normal es entre 8 - 12 mEq/l.

 Cetoacidosi Diabética: La cetoacidosis diabética (CAD)
hace referencia a una descompensación de la diabetes
mellitus que, junto con el estado hiperosmolar y
la hipoglucemia - secundaria al tratamiento, son las tres
principales complicaciones agudas de la diabetes mellitus. A
diferencia de las complicaciones crónicas, esta complicación
se desarrolla en cuestión de horas y pone en peligro la vida
del paciente, por lo que se considera una urgencia médica.
 Metanol: También conocido como alcohol de
madera o alcohol metílico (o raramente alcohol de quemar),
es el alcohol más sencillo. Su fórmula
química es CH3OH (CH4O).
 Nefrolitiasis: Es la presencia de litos (piedras) en el riñón,
y cuando éstos se encuentran en la vía urinaria, se
denomina al cuadro Urolitiasis, debe ser manejada por un
equipo de médicos (Nefrólogos, Urólogos, y eventualmente
Endocrinólogos).
 Nistagmus: Es un tipo de movimiento involuntario de los
ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es de
arriba abajo o en forma circular (movimiento rotatorio
incontrolable). El movimiento varía entre lento y rápido y
usualmente involucra ambos ojos. El nistagmus ocurre más
frecuentemente en la infancia, pero también puede
adquirirse después en la vida.
 Vértigo: Es una sensación ilusoria o alucinatoria de
movimiento de los objetos que nos rodean o de nuestro
propio cuerpo, por lo común, una sensación de giro. El
vértigo suele deberse a un trastorno en el sistema vestibular
WEBGRAFIA:
 Toxicidad por metanol y su efecto sobre las vías visuales
Disponible en: vitae.ucv.ve/pdfs/VITAE_3373.pdf
 Metanol 4.19 Disponible
en:www.minambiente.gov.co/documentos/Guia19.pdf
BIBLIOGRAFIA:
 Manuel Repetto Giménez, toxicología fundamental. Cuarta
edición.2009.

AUTORIA:
 Bioq. Farm. Carlos García MSc
FIRMA DE RESPONSABILIDAD
__________________
Carolina Barba Toro

ANEXOS

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