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Prueba de RPR
El documento proporciona instrucciones para realizar una prueba de aglutinación rápida de partículas (RPR) para detectar sífilis. Incluye detalles sobre la preparación de muestras y reactivos, el procedimiento de la prueba, y la interpretación de resultados. Se debe mezclar suavemente los reactivos, agitar el antígeno de carbón, y leer los resultados bajo luz intensa después de rotar la tarjeta durante 8 minutos en cámara húmeda.
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Prueba de RPR
- 3. Leer elinserto del set. Permita que todos los reactivos y muestras estén a temperatura ambiente (de 20 a 30°C) antes del uso. Elabore su protocolo de ensayo para la ubicación de las muestras y los controles en la tarjeta. Suavemente mezcle los reactivos antes de su uso, evitando la formación de espuma. Agite vigorosamente el ANTIGENO CARBON por 20-30 segundos antes de usarse para asegurar su homogeneidad. Lavar la aguja con agua destilada y no con solución salina. No congelar el reactivo antígeno El set debe guardarse a una temperatura 2-8 °C. No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad indicada.
- 4. Los suerosreactivos débiles se deben ensayar nuevamente por procedimientos cualitativos y cuantitativos antes de notificar los resultados. Debe compararse un lote nuevo de suspensión de antígeno con una reactividad conocida antes de su uso diario. Examinar diariamente las agujas que se emplean para depositar el antígeno que den gotas uniformes. Deseche los reactivos si se contaminan o que no demuestran la reacción correcta con los controles. No modifique el procedimiento de la prueba. No diluya o modificar los reactivos. No limpiar la aguja dispensadora No intercambiar reactivos de diferentes lotes. No toque o raye las tarjetas.
- 5. Antígeno decarbón Controles del set reactivo y no reactivo. Sueros controles internos reactivo y no reactivo (No disponibles para la práctica de este día) Gotero Aguja Dispensadora Tarjetas de reacción para RPR. Pipetas Dispensadoras Descartables de 50ul. Solución Salina al 0.85%. Tubos y Gradillas Jeringa descartable Papel Toalla. Guantes. Lentes Protectores Gabacha Mascarilla Protocolos de trabajo. Contenedores Bolsa roja y negra
- 6. Rotador mecánicoa 100 +/- 5 RPM con un diámetro de ¾ de pulgada y una cubierta humidificante. Cronómetro. Pipetas de 10 µl, 50 µl, 150 µl, y 1000µl.
- 7. Suero oPlasma No Liquido Cefalorraquídeo. Requisitos de la muestra libres de: contaminación bacteriana, hemólisis marcada lipemia. No utilizar muestras de plasma almacenadas por más de 48 horas a temperatura ambiente (resultados falsos reactivos).
- 8. Dispense unagota (50 µl) de cada muestra dentro de cada círculo de la tarjeta mantenga la pipeta en posición vertical para asegurar el dispensado preciso. Usando el extremo plano de la pipeta mezcladora, disperse la muestra sobre todo el área dentro del círculo. Coloque la aguja en el gotero. Mezcle bien la suspensión antígeno Carbón. Apriete la botella del gotero y aspire del frasco de antígeno la cantidad de antígeno que será utilizada, Dispense algunas gotas en la cubierta de la aguja. Antes de dispensar el antígeno carbón agite la botella del gotero por unos pocos segundos. Dispense una gota en caída libre en cada uno de los círculos, manteniendo la botella en posición vertical. Colocar la tarjeta en un rotador automático Rote a 100+- 5 RPM por 8 minutos (EN CAMARA HUMEDA) Leer inmediatamente los resultados macroscópicamente en estado húmedo bajo una fuente de luz intensa.
- 9. Dispensar unagota de solución salina dentro de los círculos numerados del 1 al 5. No la esparza. Dispense 50 µl de la muestra dentro del circulo numero 1. Inserte la pipeta dentro de la gota de S.S 0.85% y mezcle cuidadosa y repetidamente de arriba abajo 5 o 6 veces. Evite formación de espuma. Transferir 50 µl de la mezcla del circulo 1 al círculo 2 y mezcle. Repita este procedimiento hasta el circulo 5 y descarte de este ultimo 50 µl. Esparza las muestras diluidas sobre el área de cada circulo, iniciando en el circulo numero 5 hasta el numero 1. Antes de dispensar el antígeno carbón agite la botella del gotero por unos pocos segundos. Dispense una gota en caída libre. Colocar la tarjeta en un rotador automático Rote a 100+- 5 RPM por 8 minutos (EN CAMARA HUMEDA) Leer Inmediatamente, los resultados macroscópicamente en estado húmedo bajo una fuente de luz intensa. Remover y lavar la aguja al final de cada corrida.
- 10. A partirde una dilución de 1:16 (10 ul de mx + 150 ul S.S 0.85%). En cinco círculos colocar una gota de solución salina al 0.85 %. no extender Depositar en el primer circulo 50 ul de muestra 1:16 Mezclar aspirando y expeliendo 5 a 6 veces (evitar la formación de burbujas) Antes de dispensar el antígeno carbón agite la botella del gotero por unos pocos segundos. Dispense una gota en caída libre. Colocar la tarjeta en un rotador automático Rote a 100+- 5 RPM por 8 minutos (EN CAMARA HUMEDA) Leer Inmediatamente, los resultados macroscópicamente en estado húmedo bajo una fuente de luz intensa. Remover y lavar la aguja al final de cada corrida.
- 11. CIRCULO 1 23 4 5 DILUCION 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 CIRCULO 1 2 3 4 5 DILUCION 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512