![• Tes bisa disederhanakan dengan hanya
mengerjakan tes:
- 100% plasma normal
- 80% plasma normal dan 20% plasma tes.
• Hitung rasio KCT dengan rumus:
KCT [80% N: 20% tes]
KCT [100%N]
• Nilai rasio ≥ 1,2, maka hasil positif
• KCT kontrol < 60 detik menunjukkan kontaminasi
plasma kontrol dengan fospolipid.
20](https://image.slidesharecdn.com/sindromaantifosfolipidcompatibilitymode-110512174739-phpapp02/85/Sindroma-antifosfolipid-compatibility-mode-20-320.jpg)
![• Tes bisa disederhanakan dengan hanya
mengerjakan tes:
- 100% plasma normal
- 80% plasma normal dan 20% plasma tes.
• Hitung rasio KCT dengan rumus:
KCT [80% N: 20% tes]
KCT [100%N]
• Nilai rasio ≥ 1,2, maka hasil positif
• KCT kontrol < 60 detik menunjukkan kontaminasi
plasma kontrol dengan fospolipid.
20](https://image.slidesharecdn.com/sindromaantifosfolipidcompatibilitymode-110512174739-phpapp02/75/Sindroma-antifosfolipid-compatibility-mode-20-2048.jpg)
More Related Content
Sindroma antifosfolipid [compatibility mode]
- 1. TINJAUAN PUSTAKA HEMATOLOGI SINDROMAANTIFOSFOLIPID (Patogenesis, Diagnosis, dan Pemeriksaan Laboratorium) Robiul F dr/ Yetti H dr SpPK 1
- 2. Pendahuluan • Sindroma antifosfolipid(SAF) adalah adanya antibodi antifosfolipid yang menetap pada tubuh dengan kejadian trombosis, atau abortus yang berulang • Ada 2 kategori: primer (tanpa SLE) sekunder (dengan SLE) 2
- 3. • Diperkenalkan Harrisdan Hughes (1980) sebagai SAF • Prevalensi SAF pada populasi umum sekitar 1- 5% • Meningkat sesuai dengan peningkatan usia • Pada pasien SLE, 30% mengalami SAF 3
- 4. Fosfolipid • Komponen utamadari semua membran sel Gambar 1. Fosfolipid 4
- 5. Patogenesis SAF Etiologi SAFmultifaktorial Infeksi (sifilis, cytomegalovirus, Epstein-Barr virus, varicella, human immunodefisiensi virus) Obat (chlorpromazine, procainamide, hydralazine, quinidine, penicillin) Neoplasma (lekemia, kelainan lymphoproliferative dan plasmacytic, tumor solid) Genetik (alel Val247 ) 5
- 6. Efek Patogenik AntibodiAntifosfolipid (aFL) • Antibodi aFL tidak hanya mengenali fosfolipid, tetapi juga phospholipid binding protein (juga disebut kofaktor) • Kofaktor tersebut antara lain cardiolipin, Beta 2-glycoprotein I (β2GPI), antitrombin, protein C, protein S, dan lain-lain. • β2GPI merupakan target penting dari antibodi aFL 6
- 7. Reaksi hemostatik β2GPI Protein C Protein S Annexin V Antibodi aFL Aktivasi sel Sel endotel Mononuklear trombosit Aktivasi komplemen 7
- 8. Manifestasi klinis Asimtomatik Trombosis Keguguran • kulit : livedo reticularis • Mata : optic neuropathy • Jantung : infark myocard • Gastrointestinal: kerusakan hepar atau lien • Neurologi : stroke, transient ischemic attack • Catastrophic SAF 8
- 9. Trombosis Trombosis terjadi karenaantibodi aFL: • mengganggu mekanisme antikoagulan endogen • melekat dan mengaktivasi platelet • interaksi dengan sel endotel dan menginduksi ekspresi adesi molekul lain • aktivasi kaskade komplemen 9
- 10. Fetal Injury Gambar3. Mekanisme efek patogenik antibodi aFL pada fetal injury (Salmon & de Groot,2008) 10
- 11. Diagnosis SAF (Eleventh International Congress on Antiphospolipid Syndrome) • Setidaknya satu kriteria klinis dan satu kriteria laboratoris • Kriteria tersebut ditemukan terpisah setidaknya 12 minggu dan kurang dari 5 tahun 11
- 12. Kriteria klinis Trombosis (dikonfirmasidengan imaging atau histopatologi) Morbiditas kehamilan: - ≥ 1 kematian fetus normal pada ≥ 10 minggu - ≥ 1 kelahiran prematur karena eklampsia atau gangguan plasenta - ≥ 3 abortus yang berurutan 12
- 13. Kriteria Laboratorium • Adanyalupus antikoagulan (LA) • Antibodi anticardiolipin (aCL) berupa IgG dan atau IgM • Antibodi anti-β2 glikoprotein-I berupa IgG dan atau IgM 13
- 14. Diagnosis lupus antikoagulan(LA) menurut guidelines International Society on Thrombosis and Haemostasis • Pemanjangan setidaknya satu dari tes koagulasi phospholipid dependent dengan menggunakan platelet-poor plasma, yaitu: - activated partial thromboplastin time - dilute prothrombin time - dilute Russle viper venom time - kaolin clotting time 14
- 15. • Pemanjangan tidakdapat dikoreksi dengan mencampur plasma pasien dengan plasma normal • Konfirmasi LA dengan melakukan penambahan fosfolipid berlebihan atau freeze-thawed platelets 15
- 16.
- 17. Kaolin Clotting Time Prinsip: •Bila APTT untuk pemeriksaan LA tanpa reagen platelet subtitusi, maka tes kurang sensitif • Tes dengan mencampur plasma normal dan plasma pasien dengan perbandingan tertentu, akan didapatkan pola respon yang berbeda 17
- 18. Gambar 4. Kurvakaolin clotting time (KCT) untuk mendeteksi adanya lupus anticoagulant 18
- 19. • Pola tipe 1 : hasil positif LA • Pola tipe 2 : defisiensi faktor koagulasi dan LA • Pola tipe 3 : antikoagulan dalam plasma • Pola tipe 4 : negatif LA 19
- 20. • Tes bisadisederhanakan dengan hanya mengerjakan tes: - 100% plasma normal - 80% plasma normal dan 20% plasma tes. • Hitung rasio KCT dengan rumus: KCT [80% N: 20% tes] KCT [100%N] • Nilai rasio ≥ 1,2, maka hasil positif • KCT kontrol < 60 detik menunjukkan kontaminasi plasma kontrol dengan fospolipid. 20
- 21. Activated partial thromboplastintime (APTT) Prinsip: • Mengukur waktu pembekuan plasma setelah mengaktivasi faktor kontak • tanpa penambahan tromboplastin jaringan • menunjukkan adanya efisiensi keseluruhan dari jalur intrinsik • Nilai normal: 26-40 detik 21
- 22. Dilute Russell’s ViperVenom Time (DRVVT) Gambar 5. Prinsip DRVVT (Hanly, 2003) 22
- 23. Interpretasi DRVVT: • Hitungrasio clotting time plasma tes dan plasma kontrol • Normal: 0,9 - 1,05. • Rasio lebih >1,05 menunjukkan: - adanya LA, -abnormalitas faktor II, V atau X, fibrinogen - inhibitor 23
- 24. Platelet Neutralisation Test Prinsip: •reagen “konfirmasi” fosfolipid komersial digunakan pada DRVVT atau APTT • Jika platelet digunakan sebagai pengganti reagen fosfolipid , maka perlu dicuci terlebih dahulu 24
- 25. Interpretasi • Bila terdapatLA, penambahan reagen “konfirmasi” fosfolipid komersial memperpendek clotting time pada pemeriksaan DRVVT atau APTT • normalized correction ratio (CR) dari clotting time DRVVT: (Pd/Nd) – (Pc/Nc) CR = ------------------------------ Pd/Nd P : plasma pasien, N :plasma normal, d :pemeriksaan untuk mendeteksi LA, c : pemeriksaan konfirmasi (platelet/netralisasi fosofolipid) • Nilai CR > 10% dapat dianggap positif LA 25
- 26. Dilute Thromboplastin InhibitionTest Prinsip: • Bila tromboplastin yang digunakan untuk Prothrombin time (PT) diencerkan, maka nilai PT akan memanjang • Pada pengenceran titik tertentu (1:50 - 1:500), konsentrasi fosfolipid menjadi rendah, sehingga cukup sensitif terhadap antibodi aFL • Reagen tromboplastin tertentu (Innovin) lebih sensitif terhadap LA. 26
- 27. • Dengan menggunakanInnovin pada pengenceran 1:200 pemeriksaan dianggap positif, bila rasio dilute PT (tes/rata-rata normal) lebih dari 1,15 27
- 28. Pemeriksaan Anti-Cardiolipin IgG/IgM Diblok dengan fetal calf serum Anti-cardiolipin Anti human–IgM/IgG IgM/IgG dalam berlabel H2O2 Cardiolipin SUBSTRAT sampel berkromogen PRODUK berwarna Gambar 6. Prinsip dasar pemeriksaan Anti-cardiolipin IgG/IgM dengan ELISA 28
- 29. • positif bila> 40 GPL atau MPL, atau > persentil ke-99 • idealnya tiap laboratorium memiliki nilai rentang sendiri sesuai populasi yang ada 29
- 30. Pemeriksaan Anti-β2GPI IgG/IgM Anti-β2GPI Anti human–IgM/IgG IgM/IgG berlabel H2O2 dalam sampel SUBSTRAT β2GPI berkromogen PRODUK berwarna Gambar 7. Prinsip dasar pemeriksaan Anti-β2GPI IgG/IgM dengan ELISA 30
- 31. • IgG/IgM positif,bila kadar > persentil ke-99 • Tiap laboratorium idealnya memiliki rentang normal sendiri sesuai populasi yang ada pada laboratorium tersebut 31
- 32. TERIMA KASIH 32
- 33. Dilute Thromboplastin InhibitionTest • pengenceran tromboplastin akan membuat pemeriksaan ini lebih sensitif terhadap kadar faktor VIII yang rendah pada hemophilia ringan, acquired hemophilia, dan kadar yang rendah pada faktor V atau faktor VII 33
- 34. Platelet neutralisation test •Positif palsu dapat terjadi pada pasien yang mendapatkan heparin intravena, dan antikoagulan oral • Hal ini dapat diatasi dengan mencampur plasma tes dengan plasma normal dengan perbandingan 50:50. 34
- 35.
- 36.
- 37.
- 38.
- 39. MEKANISME KOAGULASI SISTEM INTRINSIK SISTEM EKSTRINSIK PERSENTUHAN DENGAN PERMUKAAN ASING XII XII a VII HMWK XI XI a ca++ Thromboplastin jaringan IX IX a VII a VIII ca++ PF3 X Xa V ca++ PF3 XIII Prothrombin Thrombin XIII a Fibrinogen Fibrin 14 Fibrin Stabil 39
- 40.
- 41. SISTEM INTRINSIK SISTEM EKSTRINSIK Trauma HMWK kalikrein HMWK XII XII a prekalikrein VII kalikrein XI XI a ca2+ TF IX IX a VII a Ekstrinsik Inhibitor VIII TFPI Intrinsik VIIIa bersama PF3 ca2+ X Xa anti trombin Prot.C aktif V Va ca2+ XIII PF3 Prot.S Prothrom- Thrombin bin XIII a Prot.C fibrinolisis Fibrinogen Fibrin FDP Fibrin Stabil 6 41
- 42. Pemeriksaan APTT PPP Reagen 0,5 ml cepalin + kaolin 0.1 ml CaCl2. 0,1 ml Sentrif. 0.5 ml 2500g, 10 mnt Inkubasi 3 menit, 37˚ C 72 42
- 43. PPT Pemeriksaan secara elektromagnetik plasma 0,5 ml Masukkan dalam alat 0.05 ml Sentrifus Plat.poor 2500g, plasma 10 mnt Tambahkan Inkubasi 2 reagen 0.1 ml menit , 37˚ C W aktu koagulasi 24 43
- 44. Pemeriksaan secara optik Ambil serum 0,5 ml Masukkan dalam alat 0.1 ml Sentri. 2500g, 10 mnt Inkubasi Tambahkan slm 2 menit reagen 0.2 ml pd suhu 37˚ C LED λ 660 nm 70 44
- 45.
- 46.
- 47.
- 48.
- 49. inhibitor Ada beberapa macaminhibitor dalam proses hemostasis : 1. Anti trombin ( AT III / kofaktor heparin) 2. TFPI (tissue factor pathway inhibitor) 3.Protein C ( diaktifkan oleh protein S ) 4. Alfa 2 makroglobulin 49
- 50. Kriteria terkoreksi: (APTT Pasien – APTT Campuran) > ½ (APTT Pasien – APTT Normal ) Contoh: (terkoreksi) APTT kontrol normal:35” APTT Pasien : 60” APTT Campuran : 42” Ini menunjukan koreksi yang baik karena: (60-42) > ½ (60-35) Contoh: ( tidak terkoreksi ) APTT Kontrol normal: 35” APTT Pasien : 60” APTT Campuran : 52” Ini menunjukan tidak terkoreksi karena: (60-52)< ½ (60-35) 50
- 51.
- 52. Metode mixing test: dilakukan duplo 200µL Plasma Normal 200µL plasma pasien 200µL plasma kontrol periksa hasil APTT Terkoreksi jadi normal/tidak 8 52